Ni-NTA是用于純化6xHis標簽重組蛋白的一種純化介質,它是由4%交聯的Sepharose耦連了一種四齒螯合劑NTA而得. 它可用于在非變性或變性條件下純化任何表達系統表達的6xHis標簽重組蛋白。NTA,含有四個螯合區,較一般的三齒螯合劑能更好的結合Ni2+。6xHis 可與Ni2+螯合,從而使His標簽蛋白結合在Ni-NTA純化介質上,未結合的蛋白被洗滌下去,結合在介質上的蛋白經過一定濃度的咪唑或低pH緩沖液溫和的洗脫下來,從而得到高純度的目的蛋白。 該純化介質與His標簽蛋白具有的親力,可達5-20 mg/ml。 |